游离循环核酸

游离循环核酸（free circulating nucleic acids，CNAs）是一种存在于动植物和人体液中的细胞外游离状态核酸，包括游离循环DNA、游离循环RNA及新发现的MicroRNA（miRNA）、LncRNA、CircRNA。1948年法国科学家Mandel和Metais首次报道人血浆中可分离得到游离形式的核酸。当初人们认为核酸需在完整细胞内传递生物遗传信息，这一发现并未引起广泛关注。数十年后，植物学家Anker和Stroun发现植物诱发冠瘿肿瘤，其继发转移通过游离核酸并非完整细胞。随后，人们证实肿瘤患者血液中存在游离形式的DNA，血浆中游离DNA不仅发生基因突变，还包括了微卫星改变、倒位、缺失和甲基化等。从此，CNAs在肿瘤诊断方面的研究有了快速发展。最近，对miRNA在不同组织和疾病中的表达谱分析发现，miRNA 的表达谱具有明显的组织特异性，正常组织和肿瘤组织中 miRNA 表达明显改变，循环miRNA有可能成为肿瘤诊断的新型生物学标志物。现普遍认为细胞凋亡和坏死是循环DNA的主要来源，正常组织主要通过细胞凋亡释放产生较一致的短片段DNA，长度为185～200bp，由于不完全消化，肿瘤细胞坏死产生的DNA片段长度多样化，大多形成了长链DNA片段。DNA完整性一般用DNA长、短片段扩增产物的浓度比值表示，也有研究小组用凋亡指数（AI）表示，为DNA完整性的倒数，即DNA短、长片段扩增产物浓度之比，两者意义相似。

美国科学家Ahlquist在直肠癌患者粪便样本中发现长片段DNA，随后各种癌症患者血液中也被检测出。许多研究者对DNA完整性的临床应用进行了研究，DNA完整性检测对良恶性疾病鉴别诊断、肿瘤早期诊断、肿瘤分期、分级、疗效监测等有重要意义。血液不同于其他体液，来源于全身各处，因而血CNAs具有良好的临床应用前景。

新一代测序（next generation sequencing，NGS）、扩增阻滞突变系统（ARMS-PCR）、RT-PCR、数字PCR（Digital PCR）、荧光原位杂交（FISH）、基因芯片、免疫组化（IHC）等。