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阴性。
近年来研究HLA与疾病相关性的资料表明,某些疾病的发生率与一些特殊型别的HLA检出率有关,这些病人大多是发病机理不明并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病,因此,分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发病机理,对于疾病的诊断、预防和预后判断都有重要意义。
强直性脊柱炎( ankylosing spondylitis,AS)是一种主要侵犯脊柱并可不同程度地累及骶髂关节和周围关节的慢性进行性炎性疾病,好发于青少年,男性多于女性,且男性发病较重进展较快。AS可使受累脊柱迅速发生屈曲畸形,危害较大,治疗难度也大。AS早期症状没有特异性,容易误诊。以往长期沿用的As诊断标准为1984年修订的纽约标准,主要靠临床表现及X线检查进行了诊断。由于敏感性低,导致AS患者从出现症状到确诊平均滞后5-6年以上。AS的病因目前尚未完全例明大多认为遗传、感染、免疫环境因素等有关,其发病过程包括了做生物和留主的相互作用、免疫细胞对MHC-1类分子的识别以及细胞因子网络的失衡等方面。早在二十多年前,人们就已发现HLA-B27抗原的表达与强直性脊椎炎有高度相关性,超过90%的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性,普通人群中仅5-10%的为阳性,而强直性脊椎炎由于症状与许多疾病相似而难以确诊,因此HLA-B27的检测在病中的诊断中有着重要意义。
HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。HLA是3个英语单词的大写字头,H代表人(Human),L代表白细胞(Leucocyte),A代表抗原(Antigen),即人类白细胞抗原(以下简写为HLA)。HLA是组织细胞上受遗传控制的个体特异性抗原,最早是在白细胞和血小板上发现的,现在发现该抗原广泛分布于皮肤、肾、脾、肺、肠和心等组织器官有核细胞的细胞膜上。第8次国际组织相容性会议确定HLA有92个,分属于A、B、C、D和DR5个位点,分别称为HLA-A,HLA-B,HLA-C,HLA-D和HLA-DR。HLA-B位点有42个,B27为其中之一。
常规检测HLA抗原的方法为Terasaki 和McClelland提出的微量细胞毒实验。与传统方法相比,用流式细胞仪来检测HLA-B27的表达,灵敏度可达100%,特异性达97.4%,阴性结果强直性脊柱炎的排除率为99.9%;结果稳定,样本之间,不同仪器之间,不同实验室之间可重复性高。测定值高于参比值者为阳性,反之为阴性。
链接:强直性脊柱炎的改良纽约标准。
1、临床表现
(1)腰痛、僵硬在3个月以上,活动后症状改善,休息无改善。
(2)腰椎屈曲、侧弯活动受限。
(3)胸廓活动度低于相应年龄、性别的正常人群。
2、放射学标准 双侧骶髂关节炎大于或等于2级或单侧骶髂关节炎3~4级。
3、肯定强直性脊柱炎 符合放射学标准和1项以上临床诊断标准。
4、可能强直性脊柱炎
(1)符合3项临床标准。
(2)符合放射学标准而不具备临床标准(应除外其他原因所致的骶髂关节炎)。
在结果评估方面,我们要注意以下问题:
1、在AS患者中,HLAB27的阳性率为90%左右,而健康人群中B27阳性率为5%左右。而流式细胞术测HLA-27作为一种筛选实验,其阴性预测值很高,而阳性预测值很低,也就是说,其检测结果阴性在绝大多数情况下可以除AS,而仅凭检测结果阳性不能判是否会罹患AS。
2、由于各实验室操作程序和所用试剂的不相同,可能导致某些检测结果不一致。使用鼠源性单克降抗体能提高检测的特异性,但仍无法完全避免交又反应;同时使用两种抗体能减少假阳性结果的出现,但因为检测成本问题不可能常规操作。所以对于检测结果在临界值附近的标本,如果临床上确实有脊柱关节病相应的症状,建议最好能加用第二种HLA-B27抗体或是采用微量淋巴细胞毒实验或基因检测的方法进行确认。
3、结果判定界值及检测灰区的确定:HLA-B27表达的测定阳性结果的判定
方法根据HLA-B27细胞占淋巴细胞的百分比超过界值的多少,或是通过比较淋巴细胞中HLA-B27抗原的荧光强度和仪器设定的界值来进行。如果所用的界值偏高,检测的敏感度会降低、可能造成漏诊。研究表明与其他HLA-B组抗原起交叉反应的标本多呈HLA-B27阳性,且大多落在界值右侧荧光强度10道数范围内,固此这个范围被界定为“灰区”,这样的标本需要用其他方法验证确认HLA-B27表达情况。鉴于交叉反应的发生并不变的,因此建议各个实验室建立自己的灰区范围。
流式细胞术(流式细胞仪)。
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