利什曼原虫 (黑热病，Leishmania spp)

利什曼原虫属是一种会引起利什曼病的寄生虫，为单一细胞组成，其生活史因宿主不同而有两个不同的生活阶段，即在人和哺乳动物或体外37℃下培养的巨噬细胞中的无鞭毛体和在媒介昆虫白蛉的消化道内或22~28℃下的组织培养物中的前鞭毛体。对人和哺乳动物致病的利什曼原虫有:引起人体内脏利什曼病的为杜氏利什曼原虫（L.donovani）、引起皮肤利什曼病的为热带利什曼原虫（L.tropica）、和墨西哥利什曼原虫（L.mexicana）、引起粘膜皮肤利什曼病的为巴西利什曼原虫(L.araziliensis)等，我国的黑热病是由杜氏利什曼原虫引起的。

血清利什曼原虫抗体阴性；血清利什曼原虫抗原阴性；PCR检测黑热病DNA阴性。

致病性：受染白蛉吸吮患者的血液时，原虫便进入白蛉体内，发育繁殖成鞭毛体，7天后白蛉再次叮蛟人体时，将鞭毛体注入，少部分被中性粒细胞破坏，大部被网状内皮系统的巨噬细胞所吞噬并在其中繁殖、增生，随血流至全身，破坏巨噬细胞，又被其他单核-巨噬细胞所吞噬，如此反复，导致机体单核-巨噬细胞大量增生，以肝、脾、骨髓、淋巴结的损害为主。

临床表现：杜氏利什曼原虫引起的黑热病的临床特征为不规则高热、消瘦、贫血、白细胞减少，肝、脾、淋巴结肿大，在皮肤和黏膜形成肥厚或溃疡病变。病程晚期可出现贫血及营养不良，有精神萎靡、头发稀疏、心悸、气短、面色苍白、水肿及皮肤粗糙，皮肤颜色可加深故称之为黑热病。可因血小板减少而有鼻出血、牙龈出血及皮肤出血点等。病程中症状缓解与加重可交替出现。

药物敏感性：杜氏利什曼原虫的敏感药物为葡萄糖酸锑钠，是强杀虫剂；戊烷脒有一定的杀灭作用。

所有的皮损处应使用70%的乙醇彻底清洁，外部残渣（焦痂和分泌物）应去除；清创术后可用手术刀片刮擦溃疡底部获得分泌物制备涂片、培养或PCR阳性率高；标本可采自病变部位的边缘；用钻取活检标本中间的组织在玻片上制备印片。组织切片中无鞭毛体的识别，细针穿刺也可使用含有无菌防腐剂的缓冲生理盐水（0.1ml）和26号针头的无菌注射器来完成。通过脾穿刺获得的组织标本其阳性率最高。

①穿刺检查：可进行骨髓、淋巴结或脾脏穿刺，以穿刺物涂片，染色、镜检。

②培养法：将上述穿刺物接种于NNN培养基中，置22~25℃温箱内。经一周后若培养物中查见运动活泼的前鞭毛体，则判为阳性结果；用Schneider氏培养基，效果更好，3天即可出现前鞭毛体。

③检测血清抗体，如酶联免疫吸附试验、间接血凝试验、对流免疫电泳、间接荧光试验、直接凝集试验等。

④检测血清循环抗原：可用单克隆抗体抗原斑点试验(McAb-AST)检测血内循环抗原诊断黑热病，也可用于尿液内循环抗原检查，还可用于疗效评价。

⑤聚合酶链反应：利什曼原虫微环kDNA序列设计的引物，作PCR及DNA探针诊断黑热病，敏感性、特异性高，还能确定虫种。