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腺病毒核酸扩增荧光检测(ADV-PCR) Adenovirus Nucleic Acid Amplification Detection

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概述

参考范围

(1) 定性:参考区间:阴性;根据检测CT值(循环阈值)判断阴性/阳性结果。

(2)定量:如为定量检测试剂盒,可根据定量试剂盒的要求进行操作,报定量结果。

临床意义

腺病毒为双链DNA病毒,有100余种血清型,对呼吸道、胃肠道、尿道膀胱、眼、肝脏等均可感染。人腺病毒约1/3的已知血清型通常与人类疾病相关,但一种血清型可引起不同的临床疾患;相反,不同血清型也可引起同一种疾患。临床可引起呼吸道感染、眼部感染及胃肠炎等。呼吸道感染的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎,同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉痛等。ADV的感染途径主要为接触、输血等,感染较常见于胎儿、新生儿、孕妇、移植后及肿瘤化疗患者等。当机体免疫缺陷或免疫系统处于抑制状态下,也极易受ADV感染,如器官移植后接受免疫抑制治疗、恶性肿瘤化疗后、艾滋病患者等,这些患者一旦感染,具有较高的死亡率。 

影响因素

严格按照临床核酸扩增实验室的要求进行实验室管理。由于PCR方法敏感,要避免扩增前标本之间的交叉污染,也要避免扩增后产物的污染;同时要防止标本选择不当、采样错误、核酸的降解、丢失,扩增抑制物存在等因素对实验的影响。

1) 标本采集:由于标本的质量直接影响检测结果,所以要严格标本采集运送等过程。

全血:2mL静脉血,紫帽采血管,避免溶血、严重脂血及交叉污染;肺泡灌洗液,无菌容器留取;痰:清晨用生理盐水漱口后用力咳出深部的痰;尿液:浓缩晨尿,避免血尿、乳糜尿;浆膜腔积液、脑脊液:无菌,避免污染,为防止凝固可加EDTA抗凝。

2) 标本保存及运输:采集后立即送检(<2h),如不能立即送检2~8℃存放<48 h。避免污染及核酸降解。

3) 注意事项:腺病毒核酸扩增结果阴性,并不能完全排除腺病毒感染,需要增加送检次数及选择合适的标本类型再检,避免标本被污染及核酸降解;对于病毒核酸检测结果阳性,需结合患者病情及其它检查结果确定病毒感染所处的阶段。

干扰因素:有可能抑制核酸扩增的物质,如肝素,血红蛋白等。

方法学

以实时荧光PCR为主要技术。

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