乙型肝炎病毒核酸扩增荧光检测（HBV-PCR） Hepatitis B virus Nucleic Acid Amplification Detection

（1） 定性：参考区间：阴性；根据检测CT值（循环阈值）判断阴性/阳性结果。

（2） 定量：如为定量检测试剂盒，可根据定量试剂盒的要求进行操作，报定量结果。

乙型肝炎病毒感染可导致乙型病毒性肝炎，部分患者会进一步发展成为肝硬化甚至肝癌。乙型肝炎病毒侵入机体后，在肝细胞内进行复制繁殖。乙型肝炎病毒基因组DNA在肝细胞核内进行复制，转录，在合成核心颗粒后，被转运到肝细胞浆内，在通过内质网和细胞膜时合成其外壳部分，并以发芽的形式释放出肝细胞。

人体感染乙型肝炎病毒后，可引起细胞免疫及体液免疫应答，并激发自身免疫反应及免疫调节功能紊乱，致使病变的肝细胞产生或释放大量正常或异常的蛋白质，进一步促使免疫损害加重，使病情不断发展。

HBV-DNA定性检测主要检测病毒的阴阳性状，这是确诊乙型肝炎和初步评估乙肝治疗效果的一个重要的指标，HBV-DNA阳性是HBV传染的直接证据。HBV-DNA的定量即检测乙肝病毒在血液中的病毒含量。定量检测结果主要是对抗病毒治疗提供检测和疗效参考。

严格按照临床核酸扩增实验室的要求进行实验室管理。由于PCR方法敏感，要避免扩增前标本之间的交叉污染，也要避免扩增后产物的污染；同时要防止标本选择不当、采样错误、核酸的降解、丢失，扩增抑制物存在等因素对实验的影响。

1) 标本采集：由于标本的质量直接影响检测结果，所以要严格标本采集运送等过程。

全血：2mL静脉血，紫帽/黄帽采血管；避免溶血、严重脂血及交叉污染。

2) 标本保存及运输：采集后立即送检（<2h），如不能立即送检2～8℃存放<48 h。避免污染及核酸降解。

3) 注意事项：一次HBV核酸扩增结果阴性，并不能完全排除HBV病毒感染，需要增加送检次数，避免标本被污染及核酸降解；阴性结果代表HBV-DNA的浓度不能检测到或者在预定的阈值之下，应结合临床信息综合判断病毒感染所处的阶段。 

4) 干扰因素：有可能抑制核酸扩增的物质，如肝素，血红蛋白等。

以实时荧光PCR为主要技术。