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肺炎支原体核酸扩增荧光检测(MP-PCR) Mycoplasmal Pneumonia Nucleic Acid Amplification Detection

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概述

参考范围

(1) 定性:参考区间:阴性;根据检测CT值(循环阈值)判断阴性/阳性结果。

(2) 定量:如为定量检测试剂盒,可根据定量试剂盒的要求进行操作,报定量结果。

临床意义

肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,Mp)是引起支原体肺炎的病原体,支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主,常伴有咽炎、支气管炎。肺炎支原体感染临床症状一般较轻,起病缓,潜伏期约为2~3周,肺部常在整个病程中无任何阳性体征。大多数患者只有轻微上呼吸道感染,有咳嗽、发烧、喉咙痛、头痛及疲倦等征状,刺激性咳嗽为突出表现,多见干咳,严重者则可能患上肺炎。一般预后良好,少数可引起肺外并发症,尤其是伴有中枢神经系统病变者,其病情较重,预后较差。肺炎支原体主要通过呼吸道飞沫进行人人传播,其感染暴发流行多见于密闭环境中,如学校、幼托机构等,好发于学龄前儿童及青少年(5-20 岁),在我国社区获得性肺炎中约占肺炎总数的15%~20%,流行年可高达30%以上。一年四季均可发生,但多在秋冬时节。

影响因素

严格按照临床核酸扩增实验室的要求进行实验室管理。由于PCR方法敏感,要避免扩增前标本之间的交叉污染,也要避免扩增后产物的污染;同时要防止标本选择不当、采样错误、核酸的降解、丢失,扩增抑制物存在等因素对实验的影响。

1) 标本采集:由于标本的质量直接影响检测结果,所以要严格标本采集运送等过程。

咽拭子:用灭菌拭子适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部,迅速将拭子放入样本采集管(含有1ml生理盐水)中,尾部弃去。

2) 标本保存及运输:采集后立即送检(<2h),如不能立即送检2~8℃存放<48 h。避免污染及核酸降解。

3) 注意事项:一次MP核酸扩增结果阴性,并不能完全排除MP感染,需要选择合适标本类型并增加送检次数,避免标本被污染及核酸降解。阴性结果代表MP核酸浓度不能检测到或者在预定的阈值之下,应结合临床信息综合判断。 

4) 干扰因素:有可能抑制核酸扩增的物质,如肝素,严重溶血等。

方法学

以实时荧光PCR为主要技术。

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