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肺炎衣原体核酸扩增荧光检测(CP-PCR) Chlamydia Pneumoniae Nucleic Acid Amplification Detection

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概述

参考范围

(1) 定性:参考区间:阴性;根据检测CT值(循环阈值)判断阴性/阳性结果。

(2) 定量:如为定量检测试剂盒,可根据定量试剂盒的要求进行操作,报定量结果。

临床意义

肺炎衣原体是引起急性肺部炎症的病原体,常累及上下呼吸道,主要引起成人及青少年的非典型肺炎,也可引起咽炎、喉炎、扁桃体炎、鼻窦炎、支气管炎及肺炎。肺炎衣原体感染起病缓,病程长,一般症状轻,常伴咽、喉炎及鼻窦炎为其特点上呼吸道感染,症状消退后,出现干湿啰音等支气管炎、肺炎表现。咳嗽症状可持续3周以上。少数患者表现为高热、头痛、相对缓脉及肝脾大,重症患者出现昏迷及急性肾功能衰竭。肺炎衣原体治疗反应比肺炎支原体慢,如治疗过早停止,症状有复发趋势。老年人病死率为 5%-10%。肺炎衣原体感染方式可能为人与人之间通过呼吸道分泌物传播,也可能通过污染物传染,常在聚居场所流行,如家庭、学校、军队等。它在成人和儿童中大约引起了10-20%的社区获得性肺炎,可见于5%-10%患社区获得性肺炎的老年人,且症状严重。

影响因素

严格按照临床核酸扩增实验室的要求进行实验室管理。由于PCR方法敏感,要避免扩增前标本之间的交叉污染,也要避免扩增后产物的污染;同时要防止标本选择不当、采样错误、核酸的降解、丢失,扩增抑制物存在等因素对实验的影响。

1) 标本采集 由于标本的质量直接影响检测结果,所以要严格标本采集运送等过程。

咽拭子:用灭菌拭子适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部,迅速将拭子放入样本采集管(含有1ml生理盐水)中,尾部弃去。

2) 标本保存及运输:采集后立即送检(<2h),如不能立即送检2~8℃存放<48 h。避免污染及核酸降解。

3) 注意事项:一次CP核酸扩增结果阴性,并不能完全排除CP感染,,需要选择合适标本类型并增加送检次数,避免标本被污染及核酸降解。阴性结果代表CP核酸浓度不能检测到或者在预定的阈值之下,应结合临床信息综合判断。 

4)干扰因素:有可能抑制核酸扩增的物质,如肝素,严重溶血等。

方法学

以实时荧光PCR为主要技术。

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