嗜肺军团菌核酸扩增荧光检测（LP-PCR） Legionella Pneumophila Nucleic Acid Amplification Detection

（1） 定性：参考区间：阴性；根据检测CT值（循环阈值）判断阴性/阳性结果。

（2）定量：如为定量检测试剂盒，可根据定量试剂盒的要求进行操作，报定量结果。

嗜肺军团菌是一种广泛存在于水环境中革兰氏阴性致病菌，可入侵原生动物及人类的巨噬细胞，导致军团病。

军团病多发于夏秋季，既可暴发流行也可散发。军团菌感染的主要途径是经呼吸道感染，气溶胶、原虫是军团菌传播的重要载体。年龄较大者、基础免疫较差者、长期在宾馆、医院、大型建筑工地的人员都是军团菌感染的高危人群；空调冷却水、喷泉水、旋流池水、冷热水管道系统等人工水源是军团菌的主要生存场所及传播此病的主要来源。嗜肺军团菌是引起流行性、散发性社区获得性肺炎和医院内获得性肺炎的重要病原菌，其流行致死率高30%，散发致死率甚至高达69%。

嗜肺军团菌引起的疾病分为军团菌肺炎(Legionella pneumonia)和庞蒂亚克热(Pontiac fever)两类临床表现。军团菌肺炎属非典型性肺炎范畴，为重型，死亡率15%～30%，免疫力低下的患者死亡率高达80%。潜伏期为2～6天，症状为高热、呼吸系统症状及全身中毒性表现为特点。常有干咳或少量粘液痰，亦可见血丝、咯血。胸痛、腹泻常见。病人可因休克、呼吸衰竭、肾功能衰竭而死亡。庞蒂亚克热是一种类似流感的非肺炎型军团菌感染，又称流感样型，为症状似感冒，有发冷，发热，头痛，肌肉痛，无肺炎，一般病程3～5天自愈，无死亡病例。

严格按照临床核酸扩增实验室的要求进行实验室管理。由于PCR方法敏感，要避免扩增前标本之间的交叉污染，也要避免扩增后产物的污染；同时要防止标本选择不当、采样错误、核酸的降解、丢失，扩增抑制物存在等因素对实验的影响。

1) 标本采集 

痰液：采集痰液样本前，应让受检者刷牙并漱口以除去大部分口腔内杂菌，用力咳出气管深部的痰液于无菌痰杯中，痰量不少于1mL，以晨痰为佳。

2) 标本保存及运输：采集后立即送检（<2h），如不能立即送检2～8℃存放<48 h。避免污染及核酸降解。

3) 注意事项：一次LP核酸扩增结果阴性，并不能完全排除LP感染，需要选择合适标本类型并增加送检次数，避免标本被污染及核酸降解。阴性结果代表LP核酸浓度不能检测到或者在预定的阈值之下，应结合临床信息综合判断。 

4) 干扰因素：有可能抑制核酸扩增的物质，如肝素，严重溶血等。

以实时荧光PCR为主要技术。