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1、IgG是惟一能通过胎盘的免疫球蛋白,故引起新生儿溶血症的抗-A或抗-B为IgG类。
2、直接抗球蛋白试验和抗体释放试验用于检测新生儿结合状态抗-A或抗-B(IgG类),用于新生儿溶血症确诊;游离不完全抗体试验检测孕妇血清中游离状态抗体,用于孕妇体内抗体水平监测,预防新生儿溶血症的发生。
O型个体体内存在天然血型抗体(IgM),检测IgG抗-A或抗B时必将产生干扰。因此,试验前需将血清用二巯基乙醇溶液(0. 2M)处理,以充分破坏血清中IgM类抗体。
包括红细胞直接抗球蛋白试验,不完全抗体释放试验,游离不完全抗体试验。
(1)红细胞直接抗球蛋白试验:采集取新生儿脐带血细胞,用缓冲盐水充分洗涤,直接加入抗人球蛋白抗体。如出现凝集说明红细胞表面存在IgG类抗-A或抗-B。
(2)不完全抗体释放试验:采集新生儿静脉血样,EDTA抗凝,用缓冲盐水充分洗涤血球;将血球悬浮液缓冲盐水溶液中,使结合于细胞表面抗体充分解离,离心取上清液;将上清液与A型或B型标准红细胞混合并孵育,再加抗人球蛋白。如出现凝集说明待检红细胞表面存在IgG类抗-A或抗-B。
(3)游离不完全抗体试验:抽取静脉血凝固后分离血清,用二巯基乙醇溶液(0.2M)处理,以充分破坏血清中IgM类抗体。将中和后血清与A型或B型标准红细胞混合并孵育,再加抗人球蛋白。如出现凝集说明待检血清中存在IgG类抗-A或抗-B。
备注:新生溶血症检测的基本程序
(1)确定夫妇二人血型,预测胎儿可能会出现的血型,判断是否与母亲血型相符合。如妻子为Rh,丈夫为Rh+;妻子为O型,丈夫为A型、B型或AB型;此时,胎儿血型均会与母亲不相符合,有可能发生新生儿溶血症。
(2)对于有可能出现母胎血型不符的孕妇,均应检测抗Rh,抗-A或抗-B(IgG类),一旦抗体阳性,应测定抗体效价并动态观察。
(3)对于ABO血型抗体检测,由于胎儿红细胞抗原均来自父母,故检测孕妇血清中抗体时,可使用丈夫红细胞作为已知抗原。如出现凝集说明妻子血清中已经存在抗体。此外,还需用其他标准红细胞作为己知抗原,检测是否存在除ABO血型抗原外的抗体。
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