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NK细胞功能的检测

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概述

参考范围

尚无确切的参考值提供,请参照试剂说明书。

临床意义

1、NK细胞活性是一种细胞介导的细胞毒作用, 它不需特异性抗体参与,也无MHC限制性,不经抗原活化即能直接杀伤靶细胞。因此可用传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,将PBMC与肿瘤细胞共同培养,肿瘤细胞的存活情况可以反映NK细胞的活性,肿瘤细胞存活率低,NK细胞的活性则高。测定人NK细胞活性多以K562细胞株作为靶细胞,而测小鼠NK细胞活性则用YAC细胞株作为靶细胞。

2、NK细胞活 性下降见于大多数肿瘤患者,特别是中晚期或伴有转移的癌症患者;某些自血病和白血病前期患者,NK细胞活性随病情进展而逐渐降低,以急性期降低最为明显,缓解期患者的NK细胞活性也仍低于正常健康对照;柯萨奇病毒、心肌炎病毒、流感病毒等感染性疾病NK细胞活性下降;某些细菌和真菌感染疾病患者也见NK细胞活性低下;免疫缺陷症Chediak- Higashi综合征患者伴有先天性NK细胞缺陷;重症联合免疫缺陷征患者体内T细胞、B细胞、NK细胞的功能同时缺陷。NK细胞活性增高见于多发性骨髓瘤、肺结核等疾病。

影响因素

1、酶释法经济、快速、简便,并可做定量测定;但LDH分子较大,须靶细胞膜严重破损时才能被释出,故此法敏感性较低。

2、同位素法分为胞质释放法和胞核释放法,分别采用51Cr和3H-TdR或125I-UdR做标记物,51 Cr释放法因自然释放率高,半衰期短,已逐渐淘汰;目前临床上更多地采用胞核释放法。

3、荧光分析法检测原理是用荧光标记靶细胞,经与效应细胞共育后,离心去上清,用荧光计检测剩余活的靶细胞的荧光,其强度与NK细胞的活性成反比。

4、流式细胞术选用K562细胞为测定人NK细胞活性的靶细胞,利用碘化丙啶染料排斥法,这种染料具有只渗透到死亡细胞内的特点,用流式细胞仪检测靶细胞受NK细胞作用后的死亡率来反映NK细胞的活性。

方法学

1、酶释法。

2、同位素法。

3、荧光分析法。

4、流式细胞术。


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