原理　

人外周血细胞与该双色试剂避光孵育反应，荧光素偶联抗体与白细胞表面特异性抗原结合。采用溶血/ 洗涤的方式处理反应样本，最后将处理后的样本在流式细胞仪上进行检测。由于不同细胞抗原表达量不同，其结合的荧光素偶联抗体的数量会有差异，该样本液通过流动室时在激光照射下会被激发出不同发射波长的荧光，流式细胞仪对细胞的前向角散射光(FSC)、侧向角散射光(SSC) 和荧光信号进行收集，根据样本细胞检测的前向角散射光、侧向角散射光和荧光强度等参数信息，对HLA-B27 阴阳性结果进行判定。

该试剂由HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE 双色试剂( 流式细胞法) 和IgG2a-FITC/IgG1-PE 双色同型对照( 流式细胞法) 组成，后者使用与前者相应单克隆抗体亚型一致的免疫球蛋白。和样本反应时，与前者有着相同的非特异性结合水平，但是与相应抗原无特异性的反应。作为对照试剂，可以排除前者试剂中单克隆抗体与样本的非特异性反应，从而提高检测的准确度。

主要成分

(1)HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE 双色试剂( 流式细胞法)：HLA-B27-FITC 抗体( 克隆：HLAABC-M3)、HLA-B7-PE 抗体( 克隆：BB7.1)、磷酸盐、蛋白保护剂、防腐剂和稳定剂。

(2)IgG2a-FITC/IgG1-PE 双色同型对照( 流式细胞法)：IgG2a-FITC 抗体( 克隆：eBM2a)、IgG1-PE 抗体( 克隆：P3.6.2.8.1)、磷酸盐、蛋白保护剂、防腐剂和稳定剂。

标本类型　

EDTA 抗凝人外周血。

性能指标

（1）样本稀释一致性：取HLA-B27 阳性样本，按比例稀释为5 个不同浓度( 每个浓度重复4 次)。在BriCyte E6 流式细胞仪上，通过分析相对浓度的平均荧光强度差值来评估样本稀释一致性，计算每个稀释度的重复测试值中位数与所有稀释度测试值中位数的相对变化，见表2-24。

（2）不精密度：选取一支HLA-B27 阳性样本和一支HLA-B27 阴性样本，使用1 盒试剂对同一样本进行重复染色10 次，制备好的样本在BriCyteE6 流式细胞仪上检测，得到批内精密度，见表2-25。

选取一支HLA-B27 阳性样本和一支HLA-B27阴性样本，使用三个批次的试剂分别对同一样本各重复染色三次，制备好的样本在BriCyte E6 流式细胞仪上进行检测，得到批间精密度，见表2-26。

(3) 准确度：将HLA-B27 检测双色试剂( 流式细胞法) 的检测结果与参比试剂的检测结果采用直接对比法，在BriCyte E6 流式细胞仪上共测试204 例样本，其中97 例样本是HLA-B27 阴性，107 例样本是HLA-B27 阳性，通过计算总体符合率来考察阴阳性一致性，见表2-27。

总体符合率=( 两种试剂都是阳性样本数+ 两种试剂都是阴性样本数)/( 总样本数)×100%

染色稳定性　

建议在静脉血样本离体后24h内进行染色，染色后24h 内上机检测。

干扰因素　

禁止使用固定保存的患者样本。在染色前冷冻的血液样本会产生错误的结果。如果样本取自使用免疫抑制剂的患者，其结果分辨率较差。未成熟细胞会干扰试验结果。

储运条件　

试剂应在2 ～ 8℃环境下避光保存，未开瓶时有效期为12 个月，开瓶后有效期为90 天，禁止使用已过有效期的试剂；试剂使用冰袋低温运输，并保证试剂包装在长途运输中不受损坏、不泄漏；在存储或者与细胞孵育过程中，禁止冷冻试剂，避免光线的直接曝晒，保持试剂瓶的干燥；如试剂颜色加深、试剂变浑浊或出现沉淀等，则提示试剂失效，不可继续使用。

适用机型

BriCyte E6、BD FACSCanto Ⅱ、BD FACSCalibur BC、EPICS-XL、BC FC500。

规格与包装

可做检验项目列表

产品注册证书

产品说明书

市场评估报告