文件名称：Liquid chromatography-mass spectrometry methods；Approved guideline(液相色谱 - 质谱分析方法；批准指南)

发布日期：2014年10月

版本号：A

主要内容：质谱法在临床实验室中越来越重要，临床对LC-MS 方法的稳健性和一致性要求也越来越多，本CLSI 文件正是为响应这种情况而编写。在开始开发一项市售分析项目前，体外诊断设备供应商常常要等到该特异分析的临床效用已建立并被广泛接受。结果若没有合适的市售分析方法出现，则患者护理的改进就会延迟，分析方法开发越困难则这种延迟越明显。对于有能力开发和实施实验室开发检测(laboratory-developed tests) 的地方，质谱能快速开发极具灵敏性和特异性的稳健的分析方法，以此为基础为实验室提供有吸引力的替代解决方案。在某些时候，质谱可以替代已有市售可用的但无法满足当前临床需求的分析方法。LC-MS 技术有望成为蛋白组学研究中为新兴生物标记物快速开发临床分析方法的一项工具。先进的仪器使得LC-MS 技术能在常规临床诊断检验中应用。

虽然在临床实验室中引入MS有显著的优势，但也存在挑战。对某些分析来说存在明显的实验室间变异。目前针对MS 的标准化很有限，大多数分析变异是由于缺乏合适的市售校准品；也就是说，实验室需制备自己的校准品。例如，有实验室用粉末或市售冻干物质，有实验室用有机溶剂，也有实验室用从他们自己药房制备的校准品。此外，校准品的制备也各不相同，有用缓冲液作为溶液、用无分析物的血清或血浆作为基质或者用患者剩余标本作为校准品基质( 存在内源性分析物干扰的问题 )。不同实验室所用色谱方法不同使得分析期间基质效应有多变性。还有，许多实验室验证分析方法所对应规定或工业标准也不同。通过为LC-MS 方法在临床实验室中的开发和验证提供指南，本文件解决了上述问题。

本文件概述了成功实施LC-MS 所需许多重要元素，讨论了色谱和质谱所需基本仪器组成，以及优化开发稳健LC-MS 法所需仪器参数。另外， 本文件讨论了方法开发过程中所需考虑的分析前因素，总结了方法开发的多种元素，以及解决这些元素的最佳实践建议。本文件为LC-MS 方法验证提供指南，包括方法验证前预校验的建议。最后，本文件为质量保证提供了指南，包括质量控制和实施后监控。主要内容包括：仪器( 高效液相色谱和超高效液相色谱、质谱法的离子源、质谱分析仪、仪器性能参数 )；分析前考量 ( 待测物、内标选择、试剂和样品准备 )；分析方法开发 ( 离子转换、高效液相色谱法固定相、高效液相色谱法流动相、检查变异、误差源、分析校准、预验证)； 分析方法验证( 检测限和检测区间的低限、线性和稀释、不精密度、分析干扰、正确度 )；LC-MS 法的质量保证和质量控制( 质控材料选择、质控浓度和频率、外加质量保证/ 质控控制样品、评估质量控制可接受性、质控失败的矫正措施等 )；分析方法实施后监测 ( 能力验证、系统性能监测 )。

适用范围：本文件提供了一个介绍和指南针对液相色谱 - 质谱分析法 (LC-MS) 开发，验证和使用后定量临床应用的监测。尽管LC-MS 可用于定性分析，但本文件重点是该技术在临床定量分析上的使用。此外，尽管有商业和研究方法允许不经色谱分离直接注射来进行快速分析，但本指南专注于液相色谱 (LC) 耦合质谱分析仪 (MS)。本指南的目的是教育临床LC-MS 操作者和医疗卫生服务提供者 ( 包括医生 )，医疗卫生服务提供者基于LC-MS 方法在临床实验室使用中的优缺点可将这些检测用于患者护理决策。本文件也为基于 LC-MS的临床应用的开发和实施提供了实际指导。本文件和 CLSI 文件 C50 为质谱在临床实验室应用提供优秀的通用指南，其本身更加关注与LC-MS 相关的方法、最佳实践和仪器，LC-MS 已逐渐成为临床分析最常见的分析方法。本文件作为一个资源也可用于仪器制造商、LC-MS 试剂厂商、监管机构、教育人员及负责开发实验室标准和政策的人员。

本文件不包括当前所有LC-MS 临床应用的描述，也不包括这些方法开发和验证相关的所有信息的描述。本文件指导读者尽可能获得现有适当的资源。本文件在LC-MS 方法开发、验证和实施方面提供指南，关注下列几点：LC-MS 仪器的重要特征；能影响分析性能和效用的分析前因素； 分析校准；在方法开发中重要的分析变量；分析 验证；质量保证和质量控制；临床方法的后期监测。