文件名称：Design and validation of immunoassays for assessment of human allergenicity of new biotherapeutic drugs；Approved guideline(免疫方法评估新型生物医药的人体致敏性：设计和验证； 批准指南)

发布日期：2011年6月

版本号：A

适用范围：药物特异性人IgE抗体试验的开发过程包括最初的可行性研究阶段，以及后面的检测和确认试验建立的验证阶段。该法以按之前建立的推荐标准而开发出来的药物特异性人抗体检测为依据。文件中讨论了一些特殊难题例如在没有阳性IgE抗体质控血清时进行药物特异性IgE抗体测定的确认试验。此外，在毫微克每毫升水平检测IgE 过程中可能出现微克每毫升水平的IgG抗体，以及未稀释的人类标本检测中可能出现高水平NSB，这种潜在干扰在文中也有讨论。这些问题降低IgE 抗体检测的分析敏感度。推荐检测方案为，不使用接受药物后没有临床证据显示会出现速发型超敏反应的临床研究个体的血清。

新药有可能引起人体的免疫应答。总的来说，药物免疫毒理学引起了一系列特殊领域的研究，包括研究药物诱发抗体应答能力的评估，尤其是引起特异性IgE 抗体应答(这是超敏反应或过敏反应发生的风险因子)。1967 年，介导过敏反应的抗体的同型异构体被发现，它是一类新的人类免疫球蛋白，被称为 IgE(第五类人免疫球蛋白，字母表第五个字母，可引起红斑的抗体)。科学研究引领了 IgE 的发现。

临床上，IgE抗体测定被用于自述暴露于特定致敏原后出现致敏症状的病史后，确认个体发生致敏的诊断过程。IgE抗体被视为临床已显示的过敏症状的风险因子，而不是绝对指标。合并考虑临床阳性病史，IgE 抗体测定可以在诊断过敏性疾病中是有用的。IgE抗体测定可通过以下方法：内使用皮肤挑刺试验或注入过敏原的皮肤点刺试 验，以及使用血清或组织提取物通过免疫学方法进行检测的体外方法。每种方法都有利弊。

 皮肤试验具有吸引力是因为，它可以在个体皮肤上出现生物学反应，结果可在接触致敏原后15～20min内获得。使用阳性组胺质控和阴性盐水质控可以区分患者自身干扰，例如术前组胺给药引起的假阴性结果和皮肤划痕现象引起的假阳性结果造成的干扰。皮肤试验的主要局限性有， 由于接触致敏原而诱发过敏反应的风险；优化皮肤试验状态 (例如，设备、药物浓度、接触方式)的难题；确保药物处于特定状态(例如，与载体蛋白结合的半抗原、代谢形式)，以具有足够的致敏表位可在肥大细胞上与IgE 交联而诱导出皮肤的风团和红斑。临床治疗性药物的研究中，皮肤试验需纳入任何经历与过敏性疾病相关的典型临 床症状的个体的研究协议。

药物特异性IgE 抗体的血清学评估需要建立 一种特定方法，它包括抗体与固化药物的结合以及随后的特殊表位或抗体类型(例如IgE)的检测。 IgE 捕获和标记药物检测的替代方法确认通常被认为吸引力降低，原因将在下文中讨论。本指南描述了IgE抗生物治疗性药物检测的可行性的确认、后续的发展和确证等问题。血清学检测IgE 致敏性的优势在于，临床研究中的个体血清个在治疗前或治疗后采集。

主要内容：本文针对对新型生物疗法类药物 特异的人体免疫球蛋白E 抗体的实验室测定，从其设计、验证、分析性能和质量保证方面给出了指导。

本文件针对新型生物治疗药物临床试验入组人群的血清人免疫球蛋白E 抗体的测定，为其设计和验证提供了总体策略。本文档在以往的药物 特异性抗体指南上，编入了新的分析技术。由于IgE抗体的应答一般处于毫微克每毫升的水平级别，应对检测IgE抗体的人血清进行最小限度的稀释。本文档描述了当血清或组织提取物未稀释或浓缩处理时，出现非特异性结合(NSB)时的技术性难题。在微克每毫升水平的药物特异性非IgE抗体( 例如，IgG，和有时出现的IgA和IgM) 存 在的情况下，当毫微克每毫升水平的IgE 抗体尝 试与有限的固化药物结合时可能会发生的潜在的方法学干扰，本文档也为这种干扰提供了处理方法。指南还概述了可支持抗药物的人IgE 检测结果 ( 例如，特应性筛查，总IgE等) 解释的补充 血清学分析方法。文件还为试验试剂的质量控制提供了实用方案。

本文件中没有讨论分析测定的血液或组织中的 IgE抗体数量和个体发生I 型超敏反应临床风险之间的关系，也没有讨论对于疫苗活性成分的不良反应的评估方法。除非有澄清需要，I/LA34 文件不包含与已发布的IgG 抗体测定指南相重复的信息。用于确定阳性临界点和验证IgG抗药检测的已发布的共识性策略，对于IgE 抗体测定被认为同样是有效的，本文中讨论的由于没有阳性人 IgE 抗药物质控而引起的技术上不可行性除外。用 于监测细胞免疫应答或介质和细胞因子[例如， 白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-6，转化生长因子 β(TGF-β)] 从嗜碱细胞和肥大细胞上的释放的方法，本文没有讨论。

本文件供学术类和商业类实验室科学家和临床医师实用，也适用于进行临床前数据测定和实施新药临床试验的制造商。用于监测参加临床试验个体而建立药物特异性IgE 抗体测定的临床实验室，和制造用于监测市场化药物有效性的IgE 抗体试剂盒生产商，可能需要满足国际的、国内的、鉴定机构的、地方的和行业内的要求。关于建立用于监测药物IgE 抗体试剂盒的归属于公司的其他要求，照国家牌照进行。本文件同样适用于建立制造商安全程序的管理者，以及需要评价试验方法学、评估由新药牌照申请过程中创新药物研究者提交的变应原性数据的有效性的政府监管部门。