文件名称：Methods for antimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria；Approved standard— Eighth edition[厌氧菌抗菌药物敏感性试验方法；批准标准(第八版)]

发布日期：2012年2月

版本号：A8

适用范围：本标准中所述方法用于对常见厌氧菌进行药敏试验。琼脂稀释法可用于对各种厌氧菌进行检测。目前，微量液体培养基稀释法仅被建议用于对脆弱拟杆菌群进行试验。如有其他方法被批准，将在后续版本的M11 或 CLSI 文件 M100 的年度更新中公布。

主要内容：本文件描述了CLSI 参考琼脂稀释法、脆弱拟杆菌群的可选微量液体培养基稀释法及厌氧菌β- 内酰胺酶试验方法。琼脂稀释法是所有厌氧生物的推荐参考方法，非常适合于监测试验和研究。微量液体培养基稀释法时一种更加简单方便的方法，允许对一个微量稀释托盘中的多种抗菌剂进行试验，但目前仅限于对脆弱拟杆菌 群生物和选定的抗菌剂进行试验。简单来说，在琼脂板或液体培养基 (添加到滴定板的加样孔中) 制备两倍稀释系列抗菌剂进行试验。然后，试验生物的标准化悬架被接种到每个琼脂表面或每个加样孔中。孵化后，对每个板或每个加样孔中的生长情况进行检查，并确定最小抑菌浓度(MIC)。 严格遵守本标准中所述方法对取得重现性(实验室间和实验室内) 结果是非常重要的。

识别与迟缓埃格特菌ATCC®a 43055 相关的问题时，工作组确定了一种用于具有革兰氏阳性厌氧菌抗菌活性的药剂的新型质量控制生物。C. 艰难梭菌ATCC® 700057是一种非产毒性菌株，CLSI 文件M100 的表4D 中包含23 种药物的琼脂稀释法质量控制值。

工作组期望通过使用本标准中推荐的方法，提高研究中的试验一致性，并作为所有未来对比和临床研究的黄金标准。临床实验室可能采用商用的微量液体培养基稀释法或琼脂稀释法对患者分离菌群进行常规药敏试验，但应严格遵守制造商的使用说明，且实验室应确保质量控制值在可接受的范围内。

与本标准一同使用时，CLSI 文件M100 中 的表格将显示药物选择、说明、质量控制和采用 M11 中的标准化程序的抗菌谱报告的最新信息。 用户应使用这些新表格替换先前标准中的表格。 M11-A8 中的主要内容包括：厌氧菌药敏试验的适应证 (常规试验、监测试验)、厌氧菌药敏试验的局限性[解释标准(断点)和临床相关性、 菌种 ]、抗菌剂 (来源、抗菌剂粉末的称量、储备溶液的制备、试验浓度)、常规试验和报告用抗菌剂的选择 ( 常规报告、非专利药名)、试验分离菌群的储存和恢复(未来试验用隔离群的冷冻、恢复冷藏分离菌群 )、稀释试验用种菌制备 (种菌制备浊度标准、直接菌落悬浮法、生长方法)、β- 内酰胺酶试验[琼脂稀释法参考程序(沃兹沃思方 法 )、试剂和材料、准备琼脂稀释板的程序、琼脂稀释板的接种、琼脂稀释板的读取]、微量液体培养基稀释程序(试剂和材料、准备微量液体培养基稀释板的程序、微量液体培养基稀释托盘的接种、微量液体培养基稀释托盘的孵化、微量液体培养基稀释端点的读取)、质量控制指南(目的、质量控制生物和试验频率、纠正措施) 等。