文件名称：Methods for determining bactericidal activity of antimicrobial agents；Approved guideline(抗菌剂杀菌活性的确定方法；批准指南)

发布日期：1999年9月

版本号：A

适用范围：由于越来越多的患者不具备正常的宿主免疫防御功能及各类新的抗菌剂的引入，需要确定评估抗菌剂杀菌活性的实验室方法。通过杀菌试验可以大概预测细菌的清除情况。应该注意的是，有一些其他因素( 如亚抑菌浓度抗生素的抗菌后效应和生长抑制效应) 也可能会影响患者在细菌学上的反应。评估杀伤活性的特殊药敏试验通常不适用于所有微生物，只适用于异常情况，如心内膜炎。因此需要确定统一的试验方法，以便对不同数据集进行对比。目前，杀菌试验的方法正在确定当中，在实证层面和临床相关性方面需要进行更多工作。本文件所述的方法主要用于试验在经调整的M-H 培养基或添加有人类血清或超滤液中培养后仍能生长的需氧细菌。

主要内容：普遍由临床微生物实验室进行的全部药敏试验的方法( 如纸片扩散法、培养基稀释法和琼脂稀释法) 均可对抗菌剂的抑菌活性 (MIC) 进行测量。在大部分临床情况下这样已经足够了，因为从传染角度来看，抗生素的作用就是通过防止新现场微生物重复出现从而防止细菌传播；宿主防御机制的主动参与最终实现了细菌清除和临床治愈。通过抗菌分析可以获得关于使用抗菌剂的药物动力学方面附加的有价值信息，再结合 MIC 便可预测出细菌清除情况。

临床上有时需要采用抗菌剂实现杀菌活性，如心内膜炎的治疗。这种需求也可能出现于脑膜炎、骨髓炎及免疫力低下患者的感染。临床耐药性使杀菌试验很少成为必需检测项目。

体外试验方法可能用于评估杀菌活性，如测定 MBC 或使用时间 - 杀菌动力学方法。缺乏临床经验或测定方法不能随时可用时，血清杀菌试验可能会更加有用。血清杀菌试验将药效和药物动力学性能集于一体。根据对血清杀菌试验所作的某些改动，可以相对于MBC 对杀菌活性进行定性评估 (血清杀菌效价)，对随时间杀菌快速性进行动态评估 ( 血清杀菌速度 )，或同时对血清杀菌活性的大小及其持续时间进行评估(杀菌效价曲线下的面积)。此外，从接种过抗生素 (体外) 的个人(如志愿者) 身上提取血清这一方法可以用于评估各类药物或同类药物对各种各样微生物的抗菌杀菌活性。

由于血清杀菌试验的复杂性( 包括使用的特 殊方法、有寿命的血清样本的合理采集及结果说 明 ) 和缺乏清楚记录该试验且可用于大部分感染 情况的临床资料，因此建议在进行该试验之前， 必须与微生物实验室进行磋商。微生物实验室主 管会为以下工作提供有用帮助：①确定该试验是 否必须进行；②选择CLSI 建议的试验方法；③说 明试验结果。关于进行血清杀菌试验时采用的方 法，可参见最新版 CLSI 文件M21《血清杀菌试验 的方法》。

 本指南说明了杀菌试验的详细信息，特别是方法变化造成的影响，统一了临床微生物实验室中的杀菌试验方法。本指南将杀菌试验作为评估临床相关性的一种工具。本文件所述的方法主要用于试验在经调整的M-H 培养基或添加有人类血清或超滤液中培养后仍能良好生长的需氧细菌，如第2.2.1 小节所述。以后将详细说明对更多需要特殊营养的微生物所作的改动，如厌氧菌。

主要内容包括确定杀菌活性的试验方法( 抗菌溶液的制备、普通培养基培养基、时间- 杀菌方法、稀释方法、制备接种菌)、确定终点(时间杀菌法、琼脂培养基稀释平板计数法、最小杀菌浓度)、说明、质量控制 (目的、方法控制、选定对照菌株、建议质量控制菌株、批量控制、其他控制方法) 等。