文件名称：Methods for broth dilution susceptibility testing of bacteria isolated from aquatic animals；Approved guideline—Second edition[培养基稀释法对水生生物中分离的细菌进行药敏试验； 批准指南(第二版)]

发布日期：2014年9月25日

版本号：A2

适用范围：本指南为兽医和水生动物疾病诊断实验室提供了标准化的培养基稀释药敏试验方法 (参见VET03/VET04-S21表1)，包括用于两种菌株的QC标准。还提供了用于其他水生动物病原菌的推荐检测方法。为了避免混淆，自上一版开始，每个“组”的生物体及其相应的编号都没有改变。

相应的VET03/VET04-S21 文件中的补充表格列出了全球水产养殖业使用的抗生素、制备抗生素母液和稀释剂的方法和细菌致病的鱼类。

还有首次达成共识的临床断点和一种水生病原体——杀鲑气单胞菌的流行病学临界值(ECVs)。临床断点是在抗生素药敏试验数据、非常有限的药代动力学(PK)数据和临床疗效数据的基础上建立。PK和疗效的数据之前是在研究给 加药饲料使用正常剂量的方法 (发达国家认可和/或普遍使用的方法) 上得到的(参见VET03/ VET04-S21 表 12)，而ECVs是通过来自不同地区的杀鲑气单胞菌菌株的抗生素药敏性试验数据建立的(参见VET03/VET04-S21 表13)。随着越来越多通过标准方法获得的药敏性数据的出现，PK 数据和临床疗效报告也成为可能，本文件和CLSI 的 VET033文件将进行修订以增加这些数据。

主要内容：药敏试验旨在了解病原微生物对对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。水生生物中许多致病菌所需的生长环境与陆生生物中的不同。因此，对于需要特定生长环境(例如低温、半固体培养基或补充培养基等) 的生物体来说，开发抗生素药敏试验标准显得非常有必要。

本指南介绍了两种标准化的培养基稀释法和QC标准，来检测1到3组水生细菌。组1的细菌在CAMHB培养基上，(22±2)℃和 (28±2)℃下容易生长。组3的细菌在稀释的CAMHB培养基上，18℃或 28℃下容易生长。QC 在大肠杆菌ATCC® 25922 和杀鲑气单胞菌亚种的范围内。在18℃、 22℃、28℃和 (35 ± 2)℃下进行检测时，嗜水气单胞菌ATCC列出了对全球水产养殖具有重要性的不同抗生素。

在这次修订中，相应的补充文件VET03/ VET04-S21 给出了两个新的表格，包含了第一个达成共识的解释标准——临床断点(敏感的、中等的、有抵抗性的) 和流行病学临界值(野生型临界值)——用于杀鲑气单胞菌菌株。还需要适用于其他水生病原菌的测试方法和解释结果，如革兰氏阳性球菌，以及新出现的病原体，如弗朗西斯菌属。其他的解释标准也有待开发，用于说明药物药效动力学和药效学性质，体外药敏试验数据和临床报告之间的相关性。