出现偶发总蛋白数值偏低（患者数据间隔两天，总蛋白从76变成47）或偏高（总蛋白结果130或者更高），肌酐、尿酸数值偶发偏高（在历史值正常的情况下，患者肌酐120以上，尿酸600以上）的情况。复测后结果都能恢复正常。

且样本跳值方向无规律性，跳值使用的反应杯也没有变化规律。同事告知反应杯上周刚更换完毕，应该也不需要考虑反应杯的问题。同志们又将影响因素放在搅拌棒上，怀疑搅拌棒污染，想通过更换搅拌棒的方式尝试一下有无效果。但工程师出于对搅拌棒本身的质量评估认为可能与其无关。

究竟是什么原因导致的跳值有高有低、毫无规律呢？带着这些疑问，上班第一天我就在仪器前盯着反应曲线。

从早上八点质控通过开始，一直到十点二十，所有的结果都很顺利，历史值检验、结果逻辑关系都符合项目要求。

从十点二十开始，出现第一例总蛋白135的样本结果，隔5个标本又出现总蛋白45、肌酐125的样本结果。通过观察反应杯号，分别在132、145 、35号位置，也没有规律可谈。且随着样本检测量增多，这种跳值现象的频率越来越高。

此时我们用一管样本进行分杯检测，观察其重复性，结果依然如此，总蛋白从72跳至140，再跳至95，肌酐结果75、 92、 120，重复性检测结果惨不忍睹。此时我翻出同一个样本两次总蛋白的结果反应曲线，给了我一个极大的冲击。

如图所示，总蛋白反应曲线提示，加入样本的起始就出现了巨大差异。出现问题的三个项目都是同时经过三号样本针进行加样，脑子里闪现出了一个猜测。我回身问工程师，是否考虑仪器硬件问题，我怀疑样本加样管路出现故障。工程师回复，仪器已经使用10年，曾经在别的医院遇到过仪器管路老化的情况，非常少见，但是可以考虑硬件损伤的可能性。

为了验证猜想是否成立，我们将三号样本管路与四号样本管路进行位置对换，再做一次重复性，此次结果完全符合预期。

更换位置后的三号样本针对应的仪器项目（总蛋白、肌酐、尿酸）重复性良好，而四号样本针对应的白蛋白则出现了与总蛋白相同的情况，检测结果分别为42、100、59，重复性极差。

我们按照这种思路，准备对样本管路进行检修。在仪器停机后拆机发现，D模块3号样本针对应的管路，在摆臂连接处出现一个细微的漏洞（红色胶托与硬管结合处），这也是仪器摆臂幅度最大、最强的地方，与其他医院出现的管路损伤地方一致。紧急更换样本管路后，重新进行校准、质控，一切恢复正常。

图 红色胶托与硬管结合处

图 机械臂转动处

此次意外情况的解决依然得益于对反应曲线的学习和认知。

生化反应曲线是利用分光光度仪原理，运用朗伯-比尔定律，当相应的比色杯每一次通过光路系统时，光路系统会测量并记录下相应的吸光度。对于终点法来说，被测物质在反应过程中完全被转变为产物，到达反应终点，根据终点吸光度的大小求出被测物浓度。终点法参数设置简单，反应时间一般较长，精密度较好[1]。

总蛋白采用双缩脲法，碱性条件下，蛋白质多肽键与铜离子络合形成紫红色化合物，在546nm波长有最大吸收。在反应到达终点，即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时，选择一个终点吸光度值，用于计算结果。

总蛋白的结果计算公式：

待测物浓度CU=（待测吸光度AU/试剂校准吸光度AC）×校准品浓度[2]。

总蛋白结果假性升高的原因：一般常见于输注含有蛋白质的溶液或者羧甲基氨基甲烷以及样本溶血；假性减低则见于铵盐影响。

当测定结果超出范围时，应考虑的原因有：参数设置是否错误、试剂是否在效期内、比色杯及吸样针是否洁净。

本次总蛋白结果异常，结果重复性较差，从加入样本开始就出现了较大偏差，参考仪器设备前后保养情况，怀疑在吸样管路破损处，对于此次总蛋白每次吸入样本会产生一定的泄露或者细小纤维蛋白携带，导致下一个样本加入时出现样本量过低，或者样本携带污染，因此引发总蛋白结果时高时低，没有规律性。也符合样本真实表现。

这次事件的处理也让我们对反应曲线应用的认识更多一步，通过反应曲线，不仅能够反映该样本的反应过程、结果是否可靠，还能够反映出仪器本身硬件问题，如光源灯质量、试剂稳定性以及样本吸样过程情况。